宝鸡地区22家综合医院临床输血管理现状分析

 　　文章通过对全市22家综合医院临床输血管理现状进行调查、统计分析,为卫生行政部门制定科学、有效的干预措施提供决策依据。
 
　　目的　克隆猪干扰素α(Interferon alpha, IFN-α)基因,构建真核表达载体,并在毕赤酵母菌中表达,分析其生物学性状,为进一步研究猪IFN-α基因生物学活性和应用奠定基础。方法　1)用植物血凝素诱导猪外周血中的淋巴细胞, Trizol试剂提取总RNA;经RT-PCR扩增猪IFN-α基因,获得约500bp的1条特异带,回收后连接到pMD18-T载体上,经酶切鉴定、测序正确后进行序列分析。2)将目的基因IFN-α 连接到pPIC9K载体上,构建真核重组表达质粒pPIC9K-IFN- α。经PCR、酶切及测序鉴定正确后,电转至毕赤酵母GS115 菌中,筛选阳性菌株。获得的阳性菌株经甲醇诱导, SDS- PAGE电泳检测IFN-α蛋白表达,并经Western blot分析其蛋白表达反应原性。结果　1)成功地克隆辽宁黑猪IFN-α基因,序列分析表明,所克隆出的猪IFN-α序列与Genebank所登录的猪IFN-α核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别是97·8%和94·6%;其序列与其它种属核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别在24%-95·3%和24·8%-90% 之间。2)成功构建重组表达质粒pPIC9K-IFN-α;其转染酵母菌的阳性重组菌经甲醇诱导4d,获得分泌蛋白的相对分子质量约为19 KDa,且在48h表达量最高,并能与相应抗体产生特异免疫反应。结论　成功克隆到了猪IFN-α的基因,其全长为497bp。构建的真核表达质粒pPIC9K-IFN-α在毕赤酵母中成功表达,且经诱导可获得分泌蛋白表达。
 
　　输血科(血库)是新兴的、涉及多学科的综合性科室,它担负着为临床各科提供医疗用血和指导输血的重要任务,是医院建设中的重要组成部分,其作用已深入到临床医学的各个方面。因此输血科的发展建设与管理,输血工作质量的好坏,直接影响着临床医学的发展、医院整体医疗工作的质量和病人的生命安危。